【PBS缓冲液配制标准操作规程】为确保实验过程中PBS（磷酸盐缓冲液）的稳定性与一致性，保障实验结果的可重复性，特制定本操作规程。本规程适用于实验室中PBS溶液的配制与使用，适用于细胞培养、免疫检测、分子生物学等实验操作。

一、适用范围

本规程适用于实验室中PBS缓冲液的配制与储存，适用于常规实验操作及科研项目中对缓冲液质量有较高要求的场景。

二、目的

规范PBS缓冲液的配制流程，确保其pH值、离子强度及渗透压符合实验要求，避免因缓冲液质量不稳定导致的实验误差或失败。

三、原理简介

PBS是一种常用的生物缓冲液，主要由磷酸二氢钠（NaH₂PO₄）、磷酸氢二钠（Na₂HPO₄）和氯化钠（NaCl）组成。通过调节各组分的比例，可获得适宜的pH值（通常为7.2~7.4），并维持一定的离子强度，以模拟体液环境，减少对细胞或生物分子的损伤。

四、材料与仪器

- 磷酸二氢钠（NaH₂PO₄·H₂O）

- 磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·12H₂O）

- 氯化钠（NaCl）

- 蒸馏水或去离子水

- 电子天平

- 磁力搅拌器

- pH计

- 容量瓶（500mL、1L等）

- 分液漏斗（如需过滤）

- 高压灭菌器（如需无菌处理）

五、配制步骤

1. 计算配方

根据所需体积计算各成分用量：

| 成分 | 含量（g/L） |

|--------------|-------------|

| NaH₂PO₄·H₂O| 0.238 |

| Na₂HPO₄·12H₂O| 1.169 |

| NaCl| 8.0 |

注：以上为常用浓度，可根据实际实验需求调整。

2. 称量

使用电子天平准确称取上述各组分，按比例加入烧杯中。

3. 溶解

向烧杯中加入约80%的蒸馏水，用磁力搅拌器充分搅拌至完全溶解。

4. 定容

继续加蒸馏水至所需体积（如1L），搅拌均匀。

5. 测定pH值

使用pH计测定溶液pH值，若pH偏离目标值（7.2~7.4），可用少量NaOH或HCl调节至合适范围。

6. 过滤（可选）

如需无菌PBS，可通过0.22μm滤膜过滤除菌。

7. 储存

将配制好的PBS置于洁净容器中，贴上标签注明配制日期、浓度及pH值，并在4℃下保存，建议在两周内使用。

六、注意事项

- 配制前应确认所有试剂均为分析纯，避免杂质影响缓冲性能。

- 操作过程中应注意个人防护，避免接触皮肤或吸入粉尘。

- 使用前应检查pH值是否符合要求，必要时重新校准pH计。

- 若长期储存，应定期检查溶液状态及pH值变化。

七、废弃物处理

废弃的PBS溶液应按照实验室废液处理规定进行分类收集，不得随意倾倒。

八、附录

- 附录A：PBS缓冲液常见问题解答

- 附录B：标准操作流程图

本规程为实验室日常操作提供指导，具体实施应结合实验需求及实验室管理制度执行。如遇特殊情况，应及时向上级负责人报告并进行相应调整。